Дата введения 01.01.94
1. НАЗНАЧЕНИЕ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
Настоящий стандарт устанавливает метод определения массовой доли нитрата в мясе и мясных продуктах.
2. ССЫЛКИ
ГОСТ 9792—73 Колбасные изделия и продукты из свинины, баранины, говядины и мяса других видов убойных животных и птиц. Правила приемки и методы отбора проб ГОСТ 29299—92 Мясо и мясные продукты
3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Массовая доля нитрата в мясе и мясных продуктах массовая доля нитрата, определенная в соответствии с методикой, установленной в данном стандарте, и выраженная в миллиграммах нитрата калия на килограмм (в частях на миллион).
4. СУЩНОСТЬ МЕТОДА
Экстрагирование пробы горячей водой, осаждение белков и фильтрование. Расщепление экстрагированного нитрата до нитрита с помощью металлического кадмия. Получение красной окраски путем добавления к фильтрату аминобензола сульфамида и N— 1-нафтилэтилендиамина ли гидрохлорида и фотометрическое измерение при длине волны 53N нм.
ГОСТ 29300-92
(ИСО 3091-75)
5. РЕАКТИВЫ
Все реактивы должны быть аналитическими. Вода должна быть дистиллированной или иметь эквивалентную чистоту.
5.1. Цинковые стержни длиной около 15 см и диаметром 5—7 мм.
5.2. Расшоры для осаждения белков
5.2.1. Реактив I
Растворяют в воле 106 г железосннеродистого калия K4Fe(CH)6-3H,0 и разбавляют до 1000 см'.
5.2.2. Реактив II
Растворяют в воде 220 г уксуснокислого пинка |Zn(CH.C00)2-2H30| и 30 см5 ледяной уксусной кислоты и разбавляют до 1000 см'.
5.2.3. Бура, насыщенный раствор
Растворяют 50 г тетраборнокислого натрия (Na:B.O, ЮН,О) в теплой воде, разбавляют до 1000 см3 и охлаждают до комнатной температуры.
5.3. Сульфат кадмия, раствор 30 г/дм1.
Растворяют 37 г сульфата кадмия (3CdSO, 8Н,0) в воде и разбавляют до 1000 см3.
5.4. Соляная кислота, 0,1 моль/дм3 раствор.
Разбавляют водой 8 см3 концентрированной соляной кислоты (р1о 1.19 г/см3) до 1000 см3.
5.5. Буферный аммиачный раствор, рН 9.6 9,7.
Разбавляют 20 см5 концентрированной соляной кислоты (рм 1.19 г/см') в 300 см' воды. Перемешивают и добавляют 10 г этилендиамшпетроацетата натрия |СН2М(СН2СООН)СН,СОО№|2 2Н20 и 55 см3 коицагт-рированного аммиака (р2(| 0,88 г/см1). Доливают водой ло 1000 см\ перемешивают и проверяют рН.
5.6. Нитрит натрия, эталонные растворы.
Растворяют в воде 1.000 г нитрита натрия (\аМО,) и разбавляют до 100 см' в мерной колбе с одной меткой. С помощью пипетки приливают 5 см' раствора в мерную колбу вместимостью 1000 см3 и разбавляют до метки.
Г отовят серию эталонных растворов, вливая с помощью пипетки 5. 10 и 20 см1 полученного раствора в мерные колбы вместимостью 100 см3 и доливая водой до метки. Полученные эталонные растворы содержат соответственно 2.5; 5,0 и 10,0 мкг нитрита натрия на I см3.
Эталонные растворы и разбавленный (0.05 г/дм3) раствор нитрита натрия, из которого их получают, следует готовить в день проведения анализа.
5.7. Растворы для получения окраски
5.7.1. Раствор 1
Растворяют, подогревая на водяной бане. 2 г аминобензола сульфамида (Гч:Н2С6Н4502МН2) в 800 см5 воды. Охлаждают, при необходимости фильтруют и добавляют, помешивая, 100 см3 концентрированной соляной кислоты (р20 1.19 г/см3), затем доливают водой до 1000 см3.
5.7.2. Раствор II
Растворяют в воде 0.25 г Л'— 1-нафтилэтилендиамина днгидрохлорида (С10Н.>О1СН,>Ш, 2ПС1). Доливают водой до 250 см3. Полученный раствор хранят в холодильнике в хорошо укупоренной бутыли из коричневого стекла не более недели.
5.7.3. Раствор III
Растворяют 445 см' концентрированной соляной кислоты (р:и 1,19 г/см5) водой до 1000 см3.
5.8. Нитрат калия, эталонный раствор.
Растворяют в воде 1.465 г нитрата калия (КГ^Ю3) и разбавляют до 100 см1 в мерной колбе. С помошью пипетки приливают 5 см3 полученного раствора в мерную колбу вместимостью 1000 см' и разбавляют до метки.
Полученный раствор содержит 73.25 мг нитрата калия на I см3.
Эталонный раствор готовят в день проведения анализа.
Прибор для расшсплсния шлрага
6. ОБОРУДОВАНИЕ
Обычное лабораторное оборудование, а также:
6.1. Механическая мясорубка лабораторного типа с перфорированной пластиной, диаметр отверстий которой не превышает 4 мм.
6.2. Аналитические весы.
6.3. Мерные колбы с одной меткой вместимостью 100. 200 и 1000 см3 в соответствии с ГОСТ 1770.
6.4. 11ипеткн с одной меткой вместимостью 10 и 20 см3, при необходимости с другой емкостью в зависимости от аликвоты фильтрата (и. 8.8.1), соответствующие требованиям Н'ГД.
6.5. Кипяшая водяная баня.
6.6. Гофрированная фильтровальная бумага диаметром около 15 см, не содержащая нитрита и нитрата.
6.7. Стектянное оборудование для расщепления нитрата (см. чертеж).
6.8. Фотоэлектрический колориметр или спектрофотометр с камерами, имеющими оптическую длину I см.
I— рск-рпулр: 2 - расгаор: Л • релиновая пробка; V кадмиевая колонна. стекловолокно: 6— решновая груока. 7 - стекающая жидкое! к
П римеча и и с. Чтобы изменять высоту капиллярной тр>бки к таким образом регулироват ь скорость потока жидкости, можно использовать гибкое соединение между дном колонны и капиллярной трубкой, по которой стекает жидкость.
6.9. Коническая колба вместимостью 300 см3.
7. ПРОБА
7.1. Используют показательную пробу массой не менее 200 г (см. ГОСТ 9792).
7.2. Пробу для анализа готовят сразу (п. 8.1) или. если это невозможно, хранят показательную пробу при температуре от 0 до 5 *С в течение не более 4 сут.
8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
8.1. Приготовление пробы для анализа
Пробу пропускают через мясорубку (п. 6.1) не менее двух раз и перемешивают. Хранят в герметичном, целиком заполненном сосуде в охлажденном состоянии. Анализ проводят не позднее чем через 24 ч после приготовления пробы.
П р и м е ч а н и с. Продукты, не подвергавшиеся кулинарной обработке, испытывают сразу же после измельчения.
8.2. Подготовка кадмиевой колонны
8.2.1. Помещают 3—5 цинковых стержней (п. 5.1) в раствор сульфата кадмия (п. 5.3), налитого в химический стакан (для одной кадмиевой колонны достаточно 1 дм' раствора сульфата кадмия).
8.2.2. Удаляют губчатый металлический осадок кадмия с цинковых стержней каждые 1—2 ч. помешивая ими в растворе или потирая их друг о друга.
8.2.3. Через 6—8 ч сливают раствор и дважды промывают осадок 1 дм3 воды, чтобы кадмий был постоянно покрыт слоем жидкости.
8.2.4. Помещают осадок кадмия с 400 см3 раствора соляной кислоты (п. 5.4) в лабораторную мешалку и перемешивают И) с. Затем возвращают содержимое мешалки в химический стакан.
8.2.5. Несколько раз перемешивают осадок кадмия стеклянной палочкой и оставляют его на ночь под слоем раствора соляной кислоты, после чего перемешивают еще раз. чтобы удалить все пузырьки газа из кадмия.
8.2.6. Сливают раствор и промывают кадмий два раза, используя каждый раз по I дм3 воды.
8.2.7. На дно стеклянной колонны для кадмия помещают стекловолокно (см. чертеж).
8.2.8. Смывают кадмий в стеклянную колонну водой до тех пор. пока слой кадмия не достигнет высоты 17 см. При заполнении колонны дают воде стекать время от времени, следя, чтобы уровень воды не опускался ниже поверхности стоя кадмия. Удаляют пузырьки газа (например, с помошью швейной иглы). Вода должна вытекать со скоростью не более 3 см3/мин.
8.3. Образец для анализа.
Взвешивают К) г пробы с точностью до 0,001 г.
8.4. Освобождение от белков
8.4.1. Помешают образен для анализа в коническую колбу (п. 6.9) и добавляют последовательно 5 см3 насыщенного раствора буры (п. 5.2.3) и 100 см3 воды температурой не ниже 70 "С.
8.4.2. Нагревают колбу на кипяшей водяной бане (п. 6.5) в течение 15 мин. периодически встряхивая.
8.4.3. Дают колбе с содержимым остыть до комнатной температуры и добавляют последовательно 2 см3 реактива I (п. 5.2.1) и 2 мл реактива II (п. 5.2.2). тщательно перемешивая после каждого добавления.
8.4.4. Переливают содержимое в мерную колбу вместимостью 200 см3 (п. 6.3). допивают водой до метки и перемешивают. Содержимое колбы выдерживают в течение 30 мин при комнатной температуре.
8.4.5. Осторожно сливают верхний слой жидкости и фильтруют его через гофрированную фильтровальную бумагу (п. 6.6), получая прозрачный раствор.
fl р и м с ч а н и е. Если необходимо определить содержание нитрата и ни фига на одной пробе, для обоих определений можно использовать один и гот же фильтрат, освобожденный от белков.
8.5. Предварительная обработка кадмиевой колонны
Промывают кадмиевую колонну последовательно 25 см3 раствора соляной кислоты (п. 5.4). 50 см3 волы и 25 см3 аммиачного буферного раствора (п. 5.5), разбавленного 1:9. Не следует давать жидкости в воронке опускаться ниже верхней части капиллярной вводной трубки кадмиевой колонны.
8.6. Проверка восстановительной способности кадмиевой колонны
8.6.1. С помощью пипетки приливают 20 см3 этаюнного раствора нитрата калия (п. 5.8) и
одновременно 5 см3 аммиачного буферного раствора (п. 5.5) в резервуар на верху кадмиевой колонны. Собирают вытекающую жидкость в мерной колбе вместимостью 100 см3.
8.6.2. Когда резервуар почти полностью опустеет, обмывают его стенки два раза, используя каждый раз по 15 см3 волы.
После того как последняя порция воды стечет в колонну, полностью заполняют резервуар водой.
8.6.3. После того как наберется около 100 см' стекшей жидкости, удаляют колбу из-под колонны и доливают водой до метки.
8.6.4. С помощью пипетки приливают 10 см3 элюата в мерную колбу вместимостью 100 см' (п. 6.3) и далее проводят анализ, как указано в пп. 8.8.2—8.8.4.
8.6.5. Если концентрация нитрита в элюате по калибровочному графику (см. п. 8.10) составляет менее 0,9 мкг нитрита натрия на I см3 (т. е. 90 % от теоретической величины), кадмиевую колонну выбраковывают.
8.7. Перевод нитрата в нитрит
8.7.1. С помошью пипетки приливают в резервуар на верху колонны 20 см3 фильтрата (п. 8.4.5) и одновременно 5 см3 аммиачного буферного раствора (п. 5.5).
Собирают жидкость, стекающую из колонны, в мерную колбу вместимостью 100 см3 (п. 6.3).
8.7.2. Проводят анализ, как указано в пл. 8.6.2 и 8.6.3.
8.8. Колориметрическое измерение
8.8.1. С помошью пипетки переносят аликвотную часть элюата ( Кем3), но не более 25 см3, в мерную колбу вместимостью 100 см' (п. 6.3) и доливают водой до 60 см'.
8.8.2. Добавляют 10 см' раствора I (п. 5.7.1). затем 6 см' раствора III (п. 5.7.3). перемешивают и оставляют на 5 мин в темноте при комнатной температуре.
8.8.3. Добавляют 2 см3 раствора II (п. 5.7.2), перемешивают и оставляют на 3—10 мин в темноте при комнатной температуре. Затем разбавляют водой до метки.
8.8.4. Измеряют показатель спектрального поглощения раствора на фотоэлектрическом колориметре или спектрофотометре (п. 6.8) с оптической длиной камеры I см и при длине волны около 538 им.
Примечание. Если показатель спектрального поглощения окрашенного раствора, полученного из образца для анализа, превышает соответствующий показатель для эталонного раствора с максимально» концентрацией, повторяют все действия, указанные в и. S.S. уменьшив количество элюата. взятого в п. 8.8.1.
8.9. Количество определений
Проводят два независимых определения на двух отдельных образцах, взятых из одной пробы для анализа.
8.10. Калибровочная кривая
8.10.1. С помощью пипетки приливают в четыре мерные колбы вместимостью 100 см3 10 см' воды и К) см5 каждого из трех эталонных растворов нитрита натрия (п. 5.6). содержащих 2.5: 5.0 и 10.0 мкг нитрита на 1 кг.
8.10.2. В каждую колбу доливают воду до 60 см3 и далее проводят анализ, как указано в пп. 8.8.2-8.8.4.
8.10.3. Вычерчивают калибровочную кривую, наносят на график полученные показатели спектрального поглощения против показателей концентрации эталонных растворов в микрограммах на 1 см3.
9. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
9.1. Подсчет результатов
Содержание нитрата в пробе, выраженное в миллиграммах нитрата калия на килограмм, вычисляют по формуле
KNO,=l.465(c уг- Na NO,),
где /и — масса образца, г;
V — объем части элюата (см. п. 8.8.1), см';
с концентрация нитрита натрия в мкг/см', определенная по калибровочной кривой и соответствующая показателю спектрального поглощения раствора, полученного из образца (см. п. 8.8.4);
№N0, — массовая доля нитрита, выраженная в миллиграммах нитрита натрия на килограмм и определенная согласно ГОСТ 29299.
За результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух определений при условии соблюдения требований к воспроизводимости (см. п. 9.2). Результат выражают с точностью до I мг на 1 кг продукта.
9.2. Воспроизводимость результатов
Разница между результатами двух определений, проведенных одновременно или в близкой последовательности одним и тем же липом, может составлять не более 10 % от среднего результата.
10. ПРОТОКОЛ АНАЛИЗА
В протоколе анализа указывают использованный метод и полученные результаты, все действия, не предусмотренные данным стандартом или рассматриваемые как дополнительные, а также любые обстоятельства, которые могли бы повлиять на результат.
В протокол должны быть также включены все сведения, необходимые для полной идентификации пробы.
1. НАЗНАЧЕНИЕ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
Настоящий стандарт устанавливает метод определения массовой доли нитрата в мясе и мясных продуктах.
2. ССЫЛКИ
ГОСТ 9792—73 Колбасные изделия и продукты из свинины, баранины, говядины и мяса других видов убойных животных и птиц. Правила приемки и методы отбора проб ГОСТ 29299—92 Мясо и мясные продукты
3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Массовая доля нитрата в мясе и мясных продуктах массовая доля нитрата, определенная в соответствии с методикой, установленной в данном стандарте, и выраженная в миллиграммах нитрата калия на килограмм (в частях на миллион).
4. СУЩНОСТЬ МЕТОДА
Экстрагирование пробы горячей водой, осаждение белков и фильтрование. Расщепление экстрагированного нитрата до нитрита с помощью металлического кадмия. Получение красной окраски путем добавления к фильтрату аминобензола сульфамида и N— 1-нафтилэтилендиамина ли гидрохлорида и фотометрическое измерение при длине волны 53N нм.
ГОСТ 29300-92
(ИСО 3091-75)
5. РЕАКТИВЫ
Все реактивы должны быть аналитическими. Вода должна быть дистиллированной или иметь эквивалентную чистоту.
5.1. Цинковые стержни длиной около 15 см и диаметром 5—7 мм.
5.2. Расшоры для осаждения белков
5.2.1. Реактив I
Растворяют в воле 106 г железосннеродистого калия K4Fe(CH)6-3H,0 и разбавляют до 1000 см'.
5.2.2. Реактив II
Растворяют в воде 220 г уксуснокислого пинка |Zn(CH.C00)2-2H30| и 30 см5 ледяной уксусной кислоты и разбавляют до 1000 см'.
5.2.3. Бура, насыщенный раствор
Растворяют 50 г тетраборнокислого натрия (Na:B.O, ЮН,О) в теплой воде, разбавляют до 1000 см3 и охлаждают до комнатной температуры.
5.3. Сульфат кадмия, раствор 30 г/дм1.
Растворяют 37 г сульфата кадмия (3CdSO, 8Н,0) в воде и разбавляют до 1000 см3.
5.4. Соляная кислота, 0,1 моль/дм3 раствор.
Разбавляют водой 8 см3 концентрированной соляной кислоты (р1о 1.19 г/см3) до 1000 см3.
5.5. Буферный аммиачный раствор, рН 9.6 9,7.
Разбавляют 20 см5 концентрированной соляной кислоты (рм 1.19 г/см') в 300 см' воды. Перемешивают и добавляют 10 г этилендиамшпетроацетата натрия |СН2М(СН2СООН)СН,СОО№|2 2Н20 и 55 см3 коицагт-рированного аммиака (р2(| 0,88 г/см1). Доливают водой ло 1000 см\ перемешивают и проверяют рН.
5.6. Нитрит натрия, эталонные растворы.
Растворяют в воде 1.000 г нитрита натрия (\аМО,) и разбавляют до 100 см' в мерной колбе с одной меткой. С помощью пипетки приливают 5 см' раствора в мерную колбу вместимостью 1000 см3 и разбавляют до метки.
Г отовят серию эталонных растворов, вливая с помощью пипетки 5. 10 и 20 см1 полученного раствора в мерные колбы вместимостью 100 см3 и доливая водой до метки. Полученные эталонные растворы содержат соответственно 2.5; 5,0 и 10,0 мкг нитрита натрия на I см3.
Эталонные растворы и разбавленный (0.05 г/дм3) раствор нитрита натрия, из которого их получают, следует готовить в день проведения анализа.
5.7. Растворы для получения окраски
5.7.1. Раствор 1
Растворяют, подогревая на водяной бане. 2 г аминобензола сульфамида (Гч:Н2С6Н4502МН2) в 800 см5 воды. Охлаждают, при необходимости фильтруют и добавляют, помешивая, 100 см3 концентрированной соляной кислоты (р20 1.19 г/см3), затем доливают водой до 1000 см3.
5.7.2. Раствор II
Растворяют в воде 0.25 г Л'— 1-нафтилэтилендиамина днгидрохлорида (С10Н.>О1СН,>Ш, 2ПС1). Доливают водой до 250 см3. Полученный раствор хранят в холодильнике в хорошо укупоренной бутыли из коричневого стекла не более недели.
5.7.3. Раствор III
Растворяют 445 см' концентрированной соляной кислоты (р:и 1,19 г/см5) водой до 1000 см3.
5.8. Нитрат калия, эталонный раствор.
Растворяют в воде 1.465 г нитрата калия (КГ^Ю3) и разбавляют до 100 см1 в мерной колбе. С помошью пипетки приливают 5 см3 полученного раствора в мерную колбу вместимостью 1000 см' и разбавляют до метки.
Полученный раствор содержит 73.25 мг нитрата калия на I см3.
Эталонный раствор готовят в день проведения анализа.
Прибор для расшсплсния шлрага
6. ОБОРУДОВАНИЕ
Обычное лабораторное оборудование, а также:
6.1. Механическая мясорубка лабораторного типа с перфорированной пластиной, диаметр отверстий которой не превышает 4 мм.
6.2. Аналитические весы.
6.3. Мерные колбы с одной меткой вместимостью 100. 200 и 1000 см3 в соответствии с ГОСТ 1770.
6.4. 11ипеткн с одной меткой вместимостью 10 и 20 см3, при необходимости с другой емкостью в зависимости от аликвоты фильтрата (и. 8.8.1), соответствующие требованиям Н'ГД.
6.5. Кипяшая водяная баня.
6.6. Гофрированная фильтровальная бумага диаметром около 15 см, не содержащая нитрита и нитрата.
6.7. Стектянное оборудование для расщепления нитрата (см. чертеж).
6.8. Фотоэлектрический колориметр или спектрофотометр с камерами, имеющими оптическую длину I см.
I— рск-рпулр: 2 - расгаор: Л • релиновая пробка; V кадмиевая колонна. стекловолокно: 6— решновая груока. 7 - стекающая жидкое! к
П римеча и и с. Чтобы изменять высоту капиллярной тр>бки к таким образом регулироват ь скорость потока жидкости, можно использовать гибкое соединение между дном колонны и капиллярной трубкой, по которой стекает жидкость.
6.9. Коническая колба вместимостью 300 см3.
7. ПРОБА
7.1. Используют показательную пробу массой не менее 200 г (см. ГОСТ 9792).
7.2. Пробу для анализа готовят сразу (п. 8.1) или. если это невозможно, хранят показательную пробу при температуре от 0 до 5 *С в течение не более 4 сут.
8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
8.1. Приготовление пробы для анализа
Пробу пропускают через мясорубку (п. 6.1) не менее двух раз и перемешивают. Хранят в герметичном, целиком заполненном сосуде в охлажденном состоянии. Анализ проводят не позднее чем через 24 ч после приготовления пробы.
П р и м е ч а н и с. Продукты, не подвергавшиеся кулинарной обработке, испытывают сразу же после измельчения.
8.2. Подготовка кадмиевой колонны
8.2.1. Помещают 3—5 цинковых стержней (п. 5.1) в раствор сульфата кадмия (п. 5.3), налитого в химический стакан (для одной кадмиевой колонны достаточно 1 дм' раствора сульфата кадмия).
8.2.2. Удаляют губчатый металлический осадок кадмия с цинковых стержней каждые 1—2 ч. помешивая ими в растворе или потирая их друг о друга.
8.2.3. Через 6—8 ч сливают раствор и дважды промывают осадок 1 дм3 воды, чтобы кадмий был постоянно покрыт слоем жидкости.
8.2.4. Помещают осадок кадмия с 400 см3 раствора соляной кислоты (п. 5.4) в лабораторную мешалку и перемешивают И) с. Затем возвращают содержимое мешалки в химический стакан.
8.2.5. Несколько раз перемешивают осадок кадмия стеклянной палочкой и оставляют его на ночь под слоем раствора соляной кислоты, после чего перемешивают еще раз. чтобы удалить все пузырьки газа из кадмия.
8.2.6. Сливают раствор и промывают кадмий два раза, используя каждый раз по I дм3 воды.
8.2.7. На дно стеклянной колонны для кадмия помещают стекловолокно (см. чертеж).
8.2.8. Смывают кадмий в стеклянную колонну водой до тех пор. пока слой кадмия не достигнет высоты 17 см. При заполнении колонны дают воде стекать время от времени, следя, чтобы уровень воды не опускался ниже поверхности стоя кадмия. Удаляют пузырьки газа (например, с помошью швейной иглы). Вода должна вытекать со скоростью не более 3 см3/мин.
8.3. Образец для анализа.
Взвешивают К) г пробы с точностью до 0,001 г.
8.4. Освобождение от белков
8.4.1. Помешают образен для анализа в коническую колбу (п. 6.9) и добавляют последовательно 5 см3 насыщенного раствора буры (п. 5.2.3) и 100 см3 воды температурой не ниже 70 "С.
8.4.2. Нагревают колбу на кипяшей водяной бане (п. 6.5) в течение 15 мин. периодически встряхивая.
8.4.3. Дают колбе с содержимым остыть до комнатной температуры и добавляют последовательно 2 см3 реактива I (п. 5.2.1) и 2 мл реактива II (п. 5.2.2). тщательно перемешивая после каждого добавления.
8.4.4. Переливают содержимое в мерную колбу вместимостью 200 см3 (п. 6.3). допивают водой до метки и перемешивают. Содержимое колбы выдерживают в течение 30 мин при комнатной температуре.
8.4.5. Осторожно сливают верхний слой жидкости и фильтруют его через гофрированную фильтровальную бумагу (п. 6.6), получая прозрачный раствор.
fl р и м с ч а н и е. Если необходимо определить содержание нитрата и ни фига на одной пробе, для обоих определений можно использовать один и гот же фильтрат, освобожденный от белков.
8.5. Предварительная обработка кадмиевой колонны
Промывают кадмиевую колонну последовательно 25 см3 раствора соляной кислоты (п. 5.4). 50 см3 волы и 25 см3 аммиачного буферного раствора (п. 5.5), разбавленного 1:9. Не следует давать жидкости в воронке опускаться ниже верхней части капиллярной вводной трубки кадмиевой колонны.
8.6. Проверка восстановительной способности кадмиевой колонны
8.6.1. С помощью пипетки приливают 20 см3 этаюнного раствора нитрата калия (п. 5.8) и
одновременно 5 см3 аммиачного буферного раствора (п. 5.5) в резервуар на верху кадмиевой колонны. Собирают вытекающую жидкость в мерной колбе вместимостью 100 см3.
8.6.2. Когда резервуар почти полностью опустеет, обмывают его стенки два раза, используя каждый раз по 15 см3 волы.
После того как последняя порция воды стечет в колонну, полностью заполняют резервуар водой.
8.6.3. После того как наберется около 100 см' стекшей жидкости, удаляют колбу из-под колонны и доливают водой до метки.
8.6.4. С помощью пипетки приливают 10 см3 элюата в мерную колбу вместимостью 100 см' (п. 6.3) и далее проводят анализ, как указано в пп. 8.8.2—8.8.4.
8.6.5. Если концентрация нитрита в элюате по калибровочному графику (см. п. 8.10) составляет менее 0,9 мкг нитрита натрия на I см3 (т. е. 90 % от теоретической величины), кадмиевую колонну выбраковывают.
8.7. Перевод нитрата в нитрит
8.7.1. С помошью пипетки приливают в резервуар на верху колонны 20 см3 фильтрата (п. 8.4.5) и одновременно 5 см3 аммиачного буферного раствора (п. 5.5).
Собирают жидкость, стекающую из колонны, в мерную колбу вместимостью 100 см3 (п. 6.3).
8.7.2. Проводят анализ, как указано в пл. 8.6.2 и 8.6.3.
8.8. Колориметрическое измерение
8.8.1. С помошью пипетки переносят аликвотную часть элюата ( Кем3), но не более 25 см3, в мерную колбу вместимостью 100 см' (п. 6.3) и доливают водой до 60 см'.
8.8.2. Добавляют 10 см' раствора I (п. 5.7.1). затем 6 см' раствора III (п. 5.7.3). перемешивают и оставляют на 5 мин в темноте при комнатной температуре.
8.8.3. Добавляют 2 см3 раствора II (п. 5.7.2), перемешивают и оставляют на 3—10 мин в темноте при комнатной температуре. Затем разбавляют водой до метки.
8.8.4. Измеряют показатель спектрального поглощения раствора на фотоэлектрическом колориметре или спектрофотометре (п. 6.8) с оптической длиной камеры I см и при длине волны около 538 им.
Примечание. Если показатель спектрального поглощения окрашенного раствора, полученного из образца для анализа, превышает соответствующий показатель для эталонного раствора с максимально» концентрацией, повторяют все действия, указанные в и. S.S. уменьшив количество элюата. взятого в п. 8.8.1.
8.9. Количество определений
Проводят два независимых определения на двух отдельных образцах, взятых из одной пробы для анализа.
8.10. Калибровочная кривая
8.10.1. С помощью пипетки приливают в четыре мерные колбы вместимостью 100 см3 10 см' воды и К) см5 каждого из трех эталонных растворов нитрита натрия (п. 5.6). содержащих 2.5: 5.0 и 10.0 мкг нитрита на 1 кг.
8.10.2. В каждую колбу доливают воду до 60 см3 и далее проводят анализ, как указано в пп. 8.8.2-8.8.4.
8.10.3. Вычерчивают калибровочную кривую, наносят на график полученные показатели спектрального поглощения против показателей концентрации эталонных растворов в микрограммах на 1 см3.
9. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
9.1. Подсчет результатов
Содержание нитрата в пробе, выраженное в миллиграммах нитрата калия на килограмм, вычисляют по формуле
KNO,=l.465(c уг- Na NO,),
где /и — масса образца, г;
V — объем части элюата (см. п. 8.8.1), см';
с концентрация нитрита натрия в мкг/см', определенная по калибровочной кривой и соответствующая показателю спектрального поглощения раствора, полученного из образца (см. п. 8.8.4);
№N0, — массовая доля нитрита, выраженная в миллиграммах нитрита натрия на килограмм и определенная согласно ГОСТ 29299.
За результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух определений при условии соблюдения требований к воспроизводимости (см. п. 9.2). Результат выражают с точностью до I мг на 1 кг продукта.
9.2. Воспроизводимость результатов
Разница между результатами двух определений, проведенных одновременно или в близкой последовательности одним и тем же липом, может составлять не более 10 % от среднего результата.
10. ПРОТОКОЛ АНАЛИЗА
В протоколе анализа указывают использованный метод и полученные результаты, все действия, не предусмотренные данным стандартом или рассматриваемые как дополнительные, а также любые обстоятельства, которые могли бы повлиять на результат.
В протокол должны быть также включены все сведения, необходимые для полной идентификации пробы.
Комментарии